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試驗探針原理的應用及使用方法、注意事項
更新時間:2024-11-14 點擊次數:2662
生物樣品往往是非常復雜的生物分子混合體,除少數特殊樣品外,一般不能直接與芯片反應,必須將樣品進行生物處理,試驗探針的原理也是根據這些做成的。
首先,必須把我們所需要的細胞、顆粒從混和細胞中分離出來。現在主要利用電場作用來分離細胞、細菌及顆粒(包括富集病毒以及破碎細胞使核酸和蛋白質釋放出來)。其中比較成熟的分離方法有介電電泳。
其原理是:在不均勻的變換頻率(在10~100kHz范圍內)的交流電場中,不同細胞或顆粒由于介電性質不同而在交變電場中形成流過速度的差別,使某一類細胞或細菌(包括病毒)得到富集,從而達到分離各種顆粒的目的。
其次,分離后的細胞或顆粒用電脈沖或其他的方法進行細胞溶解。溶解后的混和液用蛋白酶等進行處理,除去蛋白質。由于細胞中的DNA/mRNA等的含量較少,為了提高基因芯片的靈敏度,我們必須對分離出來的DNA/mRNA進行擴增。目前的擴增方法主要是PCR擴增。
后,為了獲得基因的雜交信號必須對目的基因進行標記。標記方法有熒光標記法、生物素標記法、同位素標記法等。常用的有以下幾種方法制備和標記探針:將純化的樣品RNA通過特定的引物逆轉錄合成試驗探針,在合成的過程中摻入標記物;或者先將待測樣品的RNA轉錄合成cDNA,再進一步通過加入標記物進行體外轉錄合成cRNA單鏈探針,又或者將合成的cDNA加標記物和特殊引物進行PCR擴增,制備成標記的雙鏈探針。


試驗探針的使用方法:
先用20N插座保護門試驗探針依次三個方向施加在保護門的不利的位置,同一位置三個方向施加20N的力約5秒鐘,探針金屬部分不能觸及帶插座電部件。
注意:操作期間不能旋轉探針,當探針從一個方向變動到另一個方向時,不施加力,但不能拔出探針。
然后用1N插座保護門試驗探針以三個方向施加1N的力。每個方向約5秒鐘,探針金屬部分不能觸及帶插座電部件。
注意:本次試驗需獨立碰觸,每一次碰觸后都要拔出探針。
試驗探針的注意事項:
請不要輕易調整推力,如需調整,請使用分辨精度至少為0.033N儀器對1N探針進行校準。
由于試驗探棒較為精密機械產品,使用時請輕拿輕放,妥善保管。
試驗探針的金屬部分(95w18Cr4V-HRC70)會生銹,注意保養防護。
以上便是今天關于試驗探針原理的應用及使用方法、注意事項的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。